腺病毒、慢病毒与逆转录病毒表达系统的构建和包装

可提供腺病毒、慢病毒与逆转录病毒表达系统,包括载体构建与病毒包装。您可以根据实验需要,选择合适的载体系统。病毒产品体系以慢病毒为主,腺病毒和腺相关病毒互助补充,并参照FDA、《中国药典》病毒疫苗制剂的标准,开发了以超滤,超速离心,切向流,阴阳离子交换层析,凝胶层析等纯化方法为基础的慢病毒纯化工艺,生产满足您从永生化细胞,原代和干细胞,动物体内水平以及cGMP细胞治疗水平等不同实验所需要的病毒产品。

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2016年12月30日

基因高通量测序

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流式检测技术

可提供腺病毒、慢病毒与逆转录病毒表达系统,包括载体构建与病毒包装。您可以根据实验需要,选择合适的载体系统。病毒产品体系以慢病毒为主,腺病毒和腺相关病毒互助补充,并参照FDA、《中国药典》病毒疫苗制剂的标准,开发了以超滤,超速离心,切向流,阴阳离子交换层析,凝胶层析等纯化方法为基础的慢病毒纯化工艺,生产满足您从永生化细胞,原代和干细胞,动物体内水平以及cGMP细胞治疗水平等不同实验所需要的病毒产品。

明确:FDA和《中国药典》中针对病毒疫苗等制剂的要求,主要有从病毒滴度(≥2E+8 TU/ml),质粒残留(≤4E+8 copy/ml),宿主DNA残留(≤ 10ng/ml),BSA残留(≤ 50ng/ml)等方面针对产品质量和安全性提出纯度要求,同时针对污染和载体安全性,提出了支原体,细菌等微生物安全和RCL的要求。




慢病毒系统

   慢病毒(Lentivirus )载体是以HIV-1 (人类免疫缺陷I 型病毒)为基础发展起来的基因治疗载体。区别一般的逆转录病毒,它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力,因此它可以有效地感染包括神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等在内的几乎所有的哺乳动物细胞,并且感染效率非常高,是传统方法的数倍甚至数十倍。慢病毒可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上,从而达到持久性表达,是目前最受欢迎的基因功能研究工具。慢病毒的研究发展很快,也很深入,在美国已经开展了临床研究,效果非常理想,预示着慢病毒有着广阔的应用前景。

 

 

牛启生物慢病毒系统组成

1、一个表达载体,含有目的基因、目的基因的启动子以及其它病毒包装所需的必要元件;

2、一套包含三个辅助质粒的包装质粒Mix,分别表达产生病毒所需的结构蛋白和逆转录酶;

3、293FT 细胞株,能够在表达载体;



腺病毒系统

    腺病毒是一种线性双链DNA病毒,由于其具有宿主范围广、可感染分裂和非分裂细胞、高滴度制备、外源基因装载容量大等优点,重组腺病毒已越来越广泛地被应用于基础研究和临床试验中,并成为世界上最常用的基因治疗载体之一。

   牛启生物重组腺病毒系统是将携带外源基因的腺病毒穿梭质粒与携带腺病毒基因组的包装质粒共转染包装细胞,借助Cre/loxP系统的作用重组产生腺病毒。该系统既克服了传统共转染系统重组效率低的缺点,也避免了细菌重组中的种种不确定性,实现了快速高效的腺病毒包装。


系统组成

1、一个表达载体,含有目的基因、目的基因的启动子以及一些把这个载体包装进病毒的元件;

2、293A 细胞株,能够在表达载体转染后包装出腺病毒;


系统优势

1、宿主范围广 -腺病毒可感染种类广泛的有丝分裂后期细胞;

2、包装容量大 -包装容量可以达到6 kb;

3、病毒滴度高 


先进可靠的技术 ADVANCED AND RELIABLE TECHNOLOGY

A级慢病毒纯化技术——纯度和滴度较高,感染细胞后毒性低、损伤小,同时感染效率高,能够长期稳定表达外源基因。

*滴度≥1.0E+8 TU/ml,质粒DNA残留≤4E+8 copy/ml,宿主DNA残留小于等于10 μg/ml

B级慢病毒纯化技术———病毒滴度和纯度满足原代细胞和干细胞以及动物实验的使用标准,微诱导或不诱导细胞分化,同时获得极高感染效率。

*滴度≥1.0E+9 TU/ml,质粒DNA残留≤4E+8 copy/ml,宿主DNA残留小于等于10 μg/ml

C级慢病毒纯化技术———各项指标均满足GMP标准,可用于动物体内实验和Car-T细胞治疗。全生产工艺采用国际领先的自动化设备,允许大规模制备。

*滴度≥2E+8 TU/ml,质粒DNA残留≤4E+8 copy/ml,宿主DNA残留小于等于1 μg/ml,BSA残留≤100 μg/ml




 








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